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检验学专业知识:抗菌药物敏感试验

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  凡对细菌和其他微生物具有抑制和杀灭作用的物质统称为抗菌药物。抗菌药物敏感试验(AST)的意义在于:①可抗菌治疗的效果。②指导抗菌药物的临床应用。③发现或提示细菌耐药机制的存在。④监测细菌耐药性。这部分内容,通常以选择题、判断题等形式考查,本文将对其常考点进行一个归纳整理,以帮助大家进行复习备考。

  (1)两个概念:

  1)MIC:最低抑菌浓度是抑制细菌生长所需药物的最低浓度,试验时肉眼未见细菌生长的最低药物浓度就为MIC,单位是µg/mL。

  2)MBC:最低杀菌浓度是最初的实验活菌数减少99.9%或以上所需要的最低抗菌药物的浓度,通常称为MBC。

  (2)常用方法:纸片扩散法又称K-B法(WHO推荐为定性药敏试验的基本方法,应用广泛)。

  1)原理:纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板表面,纸片中的药物吸收琼脂中的水分后向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度,在纸片周围抑菌浓度范围内测试的细菌生长被抑制,从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈,抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该抗生素对测试菌的MIC呈负相关关系。

  2)培养基:水解酪蛋白(M-H)培养基。pH为7.2~7.4;琼脂厚度为4±0.5mm。

  3)抗菌药物纸片:选择直径为6.35mm,厚度1mm,吸水量为20μl的专用药敏纸片。

  4)实验方法:用0.5麦氏比浊管校正菌液浓度,校正后的菌液应在15分钟内接种完毕。接种步骤如下:①用无菌棉拭子蘸取菌液,在管内壁将多余菌液旋转挤去后,在琼脂表面均匀涂抹接种3次,每次旋转平板60°,最后沿平板内缘涂抹1周;②平板置室温下干燥3~5分钟,用纸片分配器或无菌镊子将含药纸片紧贴于琼脂表面,各纸片中心相距>24mm,纸片距平板内缘>15mm,纸片贴上后不可再移动,因为抗菌药物会自动扩散到培养基内;③置35℃培养箱16~18小时后阅读结果,对苯唑西林和万古霉素敏感等应培养24小时。

  我们来看看它的出题方式。

  【单选题】关于抗菌药敏试验纸片扩散法的说法错误的是:

  A.又称K-B法

  B.培养基的pH为7.2~7.4

  C.是应用最广泛的方法

  D.抑菌圈的大小与该抗生素对测试菌的MIC呈正相关关系

  【答案】D。解析:纸片扩散法又称K-B法,应用广泛。培养基为水解酪蛋白(M-H)培养基。pH为7.2~7.4。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该抗生素对测试菌的MIC呈负相关关系。故本题选D。

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(责任编辑:李明)

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